SARS-CoV-2 nije otkriven u spermi pacijenata sa COVID-19. Ulazak virusa posredstvom ACE2 receptora u ciljne ćelije domaćina nije verovatan u ljudskim testisima na osnovu ACE2 i TMPRSS2 ekspresije.
Cilj:
Da se opiše detekcija SARS-CoV-2 u semenoj tečnosti pacijenata koji se oporavljaju od COVID-19 i opiše profil ekspresije ACE2 i TMPRSS2 unutar testisa.
Pacijenti:
Trideset četvoro odraslih kineskih muškaraca kojima je dijagnostikovan COVID-19 putem potvrdne kvantitativne reverzna transkriptaza-polimeraza lančane reakcije (kRT-PCR) iz uzoraka faringealnog brisa.
Glavni rezultat:
Identifikacija SARS-CoV-2 pomoću kRT-PCR pojedinačnih uzoraka ejakulata. Kvalitet sperme nije ocenjen. Obrasci ekspresije ACE2 i TMPRSS2 u testisima kod ljudi istražuju se putem prethodno objavljenih skupova podataka.
Rezultati:
Šest pacijenata (19%) pokazalo je skrotalnu nelagodnost u vezi sa virusnim orhitisom u vreme potvrde COVID-19.
SARS-CoV-2 nije otkriven u spermi posle prosečne vrednosti 31 dana od dijagnoze COVID-19. Analiza jednoćelijskih transkripcija pokazuje retku ekspresiju ACE2 i TMPRSS2, bez gotovo nikakve ekspresije preklapajućih gena.
Zaključci:
SARS-CoV-2 nije otkriven u spermi pacijenata koji su se oporavljali od COVID19 mesec dana nakon dijagnoze COVID-19. ACE2 posredovani virusni ulazak SARS-CoV-2 u ciljne ćelije domaćina nije verovatno da će se dogoditi u ljudskom testisu na osnovu ACE2 i TMPRSS2 ekspresije. Dugoročni efekti SARS-CoV-2 na mušku reproduktivnu funkciju ostaju nepoznati.
SARS-CoV-2 (teški akutni respiratorni sindrom koronavirus 2), je novi koronavirus prijavljen krajem decembra 2019. u Vuhanu, Kina. Proširio se širom sveta sa preko više miliona prijavljenih slučajeva. Razvoj u molekularnoj virusologiji i imunobiologiji SARS-CoV-2, poboljšava naše razumevanje o prevenciji, upravljanju i mogućim dugoročnim efektima COVID-19.
Iako do prenosa virusa dolazi pretežno kapljičnim putem, SARS-CoV-2 je izolovan u uzorcima krvi i izmeta pacijenata sa COVID-19, postavljajući pitanja o širenju virusa u druge telesne tečnosti, uključujući spermu, kao i alternativne načine prenosa.
Slično kao SARS-CoV 2002, ulazak virusa u ciljne ćelije od strane SARS-CoV-2 verovatno je posredovan interakcijom između virusnog (S) proteina i ćelijskog angiotenzin konvertujućeg enzima (ACE2). ACE2 se ispoljava u sistemima više organa uključujući alveolarne ćelije tipa II pluća, creva, srca, bubrega i testisa.
Čini se da transmembranska serin proteaza 2 (TMPRSS2) se sjajno vezuje za S protein i pojačava unos virusa posredstvom ACE2. Zanimljivo je da je ekspresija TMPRSS2 primećena u ćelijama epitela prostate, s aberentnom ekspresijom povezanom sa tumorgenezom.
Muški reproduktivni trakt i testisi mogu biti pogođeni nakon nekih sistemskih virusnih infekcija (npr. zaušaka). Imunološka odbrana testisa normalno štiti imunogene germinativne ćelije od odgovora domaćina. Međutim, određeni virusi su u stanju da pređu barijeru krv-testisi, ulaze u ćelije muškog reproduktivnog trakta i izazivaju imuni odgovor u testisu. Dokazi o sejanju virusa i ulasku virusa u ćelije muškog reproduktivnog trakta posle infekcija SARS-CoV-2 nisu dobro shvaćeni. Naši ciljevi su:
- opisati otkrivanje SARS-CoV-2 u spermi pacijenata koji se oporavljaju od COVID-19
- odrediti ekspresijski profil ACE2 i TMPRSS2 unutar ljudskog testisa, pružajući na taj način uvid u ulazak virusa i rani uticaj na mušku reproduktivnu funkciju.
Metode:
Identifikovali smo odrasle kineske muškarce (u rasponu od 18 do 57 godina) sa dijagnozom COVID-19 u Vuhanu (Kina) između 26. januara 2020. i 2. marta 2020. Ukupno 34 odrasla pacijenta muškog pola odabrana su za ovu studiju nakon dobijanja saglasnosti i od njih se tražilo da daju jedan uzorak ejakulata. Trajanje apstinencije pre dobijanja uzorka sperme nije standardizovano.
Pacijentima je u početku dijagnostikovan COVID-19 na osnovu kliničkih simptoma (groznica, kašalj, i respiratorni distres), a kasnije su potvrđeni kRT-PCR iz uzoraka faringealnog brisa.
Pacijenti su imali jedan ili više ovih simptoma u vreme potvrde COVID-19, ali uglavnom su pokazivali blaže simptome. SARS-CoV-2 nukleinska kiselina je ekstrahovana automatskim sistemom za ekstrakciju nukleinske kiseline (3DMed, Shanghai, Kina), prema uputstvu proizvođača. Dva ciljna gena, uključujući otvoreni okvir za čitanje 1ab (ORF1ab) i nukleokapsidni protein (N), su amplificirani i testirani pomoću RT-PCR u realnom vremenu (Anda Gene Ltd, Guangzhou, Kina). Definisana je vrednost praga ciklusa manja od 37 ciklusa kao pozitivan test, a vrednost od 40 ciklusa ili više je definisana kao negativni test, po preporukama kineskog Nacionalnog instituta za kontrolu i prevenciju virusnih bolesti.
Diskusija:
U našoj studiji nismo otkrili SARS-CoV-2 u spermi odraslih kineskih muškaraca koji su se oporavili od COVID-19. Devetnaest procenata pacijenata u našoj grupi imalo je skrotalnu nelagodu u vreme potvrde da imaju COVID-19, mada značaj toga ostaje nejasan.
Pored toga, u našem skupu podataka o scRNA-a u ljudskim ćelijama testisa, ACE2 i TMPRSS2 su slabo izraženi u testisima ljudi, a skoro nema preklapanja ekspresije gena.
Imunološka odbrana testisa štiti imunogene germinativne ćelije od reakcije domaćina, a sistemski upalni odgovor može izmeniti ovo okruženje. Mnogi virusi poput mumpsa, virus humane imunodeficijencije (HIV), humani herpes virus, ebola i Zika mogu se otkriti u spermi ljudi posle infekcije i mogu izazvati orhitis. Ovi virusi, kroz upalne procese, mogu imati negativan uticaj na mušku reproduktivnu funkciju i spermatogenezu.
Pre naše analize, uticaj SARS-CoV-2 na reproduktivnu funkciju muškaraca je u velikoj meri bio nepoznat. Ranije su naučnici prijavili patologiju testisa nakon obdukcije šest muškaraca koji su umrli od komplikacija SARS-CoV. Autori su otkrili rašireno uništavanje germinativnih ćelija i sperme, u pozadini složenog inflamatornog procesa. Iako nisu izolovali genski potpis od samog SARS-CoV, oni su zaključili da je SARS-CoV izazvao orhitis i reproduktivno oštećenje.
ACE2, verovatni receptor za ulazak virusa, prethodno je lokalizovan u Lajdigovim i Sertolijevim ćelijama. Naši podaci ukazuju da se ACE2 RNA ekspresija javlja na niskom nivou. Stoga ACE2 posredovani ulazak virusa SARS-CoV-2 u ciljne ćelije domaćina malo je verovatan na nivou ljudskih testisa.
Postoje izvesna ograničenja ove studije. Prvo, na naše rezultate utiče mali uzorak i što su muškarci sa COVID-19 u ovoj studiji pokazali blaže simptome. Prethodna istraživanja sugerisala su da je veće opterećenje virusom povezano sa težim simptomima bolesti i verovatno je da viremija ili određeni virusni prag nije postignut da pređe krvno-testisnu barijeru.
Drugo, imajući u vidu bezbednost što se tiče prenosa virusa iz uzoraka sperme, nisu se vršile sveobuhvatne analize sperme. Za studiju smo mogli da dobijemo samo jedan uzorak sperme , a samo tri pacijenta su dala uzorak u roku od 14 dana od dijagnoze COVID-19. To ograničava našu sposobnost da pružimo podatke o mogućem ranom širenju virusa u spermu.
Treće, nisu svi pacijenti u našoj grupi imali sveobuhvatan genitourinarni pregled.
Četvrto, nismo bili u stanju da procenimo hormonske profile u našoj grupi, uključujući ukupni testosteron, LH i FSH, koji bi mogli da daju procenu funkcije testisa.
Ovi preliminarni podaci ne mogu da karakterišu dugoročno uticaj COVID-19 na plodnost i endokrinu funkciju testisa. Konačno smo samo ispitali ekspresija ACE2 i TMPRSS2 na nivou ekspresije RNA. Mi znamo da genska ekspresija ne mora uvek odražavati obilje proteina i ne može se eksplicitno zaključiti da su ovi proteini odsutni. Daljnja studija distribucije i uloge ACE2 i TMPRSS2 u SARS-CoV-2 infekcija u testisima je indikovana.
Zaključak:
Nismo otkrili SARS-CoV-2 u spermi odraslih kineskih muškaraca koji se oporavljaju od COVID-19, otprilike mesec dana nakon inicijalne potvrde COVID-19. Nažalost, ne možemo definitivno isključiti prisustvo SARS-CoV-2 u semenoj tečnosti tokom akutne infekcije sa teškim simptomima COVID-19.
Potrebna su dalja istraživanja da bi razumeli dugoročni uticaj SARS-CoV-2 na mušku reproduktivnu funkciju, uključujući plodnost i endokrinu funkciju testisa.
Ukoliko imate bilo koje pitanje možete kontaktirati Centar za vantelesnu oplodnju na 0800 333 030 ili direktno Udruženje Šansa za roditeljstvo na 061/624-5224.
Izvor: www.fertstertdialog.com
